Levande cellavbildning kräver mikroskopsom minimerar fototoxicitet, upprätthåller cellviabilitet och ger högupplösta avbildning över tid. Vanliga val inkluderar:
1. Inverterade fluorescensmikroskop:
Widefield -mikroskop: utrustade med miljökontroller (temperatur, ko₂, fuktighet) och känsliga kameror (t.ex. SCMO). Ofta i par med faskontrast eller DIC (differentiell störningskontrast) för etikettfri avbildning.
Spinning Disk Confocal: Minskar fotblekning med snabbare skanning jämfört med traditionell laserskanningskonfokal. Idealisk för dynamiska processer.
2. Ljusark fluorescensmikroskopi (LSFM):
Belyser endast fokalplanet, drastiskt reducerar lätt exponering och möjliggör långvarig avbildning (t.ex. timmar till dagar).
3. Tvåfotonmikroskopi:
Används nära infrarött ljus för djupare vävnadspenetration och reducerad fototoxicitet, lämplig för tjocka prover som 3D-kulturer.
4. TIRF (Total intern reflektionsfluorescens):
Visualiserar händelser påcellmembran(t.ex. vesikelhandel) genom att avbilda en tunn (~ 100 nm) optisk sektion.
5. Superupplösningsmikroskop (t.ex. Sted, SIM):
Uppnå högre upplösning men kräver noggrann optimering för att balansera ljusexponering och cellhälsa.
6. Live-celloptimerade system:
Inkorporera miljökamrar, adaptiv optik och detektorer med svagt ljus (t.ex. EM-CCD-kameror).
Nyckelfunktioner för liveavbildning:
- Miljökontroll: upprätthåller temperatur, co₂ och fuktighet.
- Snabbförvärv: Minimerar rörelse oskärpa för dynamiska processer.
- Låg fototoxicitet: Filter, LED -ljuskällor eller belysning av lätt ark minskar skadorna.
Välj baserat på upplösningsbehov, avbildningstid och provkänslighet.
